人类FOXP3因第2号外显子跳跃而产生两种亚型，且该外显子对Treg细胞中FOXP3的功能至关重要。然而，调控其剪接的因子仍未知。
2026年5月29日，美国国立卫生研究院陈万军及武汉大学Rong Jia共同通讯在Science Advances 在线发表题为“SRSF3 determines Treg cell fate in antitumor immunity and autoimmunity”的研究论文。该研究发现，SRSF3调控FOXP3第2号外显子的功能，并决定Treg细胞在自身免疫与肿瘤免疫中的命运与功能。机制上，SRSF3促进FOXP3第2号外显子包含及蛋白表达，从而保护Treg细胞；在Treg细胞中特异性敲除Srsf3基因会导致小鼠Treg细胞严重缺陷，引发致死性系统性炎症。

人肿瘤组织中的Treg细胞呈现高SRSF3表达。SRSF3是人Treg细胞抑制功能所必需的。利用人FOXP3第2号外显子及其邻近内含子构建的人源化小鼠，其Treg细胞功能减弱，肿瘤形成显著减少，同时瘤内CD8+ T细胞浸润增加。因此，该研究揭示了SRSF3通过调控FOXP3第2号外显子包含及蛋白表达，在抗肿瘤免疫与自身免疫中控制Treg细胞命运与功能的此前未被认知的作用。

调节性T细胞（Treg细胞）在维持自身免疫耐受、预防自身免疫性疾病及炎症反应中发挥关键作用；然而，它们也可能阻碍有效的抗肿瘤免疫应答。在多种癌症中常可观察到Treg细胞的大量浸润，且该现象与患者不良预后相关。针对Treg细胞的干预策略已显示出抑制肿瘤生长的治疗效果。叉头框蛋白P3（FOXP3）已被确认为Treg细胞生成与功能调控的核心因子。FOXP3基因缺失可导致人类免疫失调、多腺体病、肠病及X连锁综合征（IPEX综合征）及小鼠（scurfy小鼠）的免疫功能障碍。人类FOXP3基因通过前体mRNA的可变剪接产生多种亚型，包括全长型（FOXP3FL）、第2外显子跳跃型（FOXP3Δ2）以及第2外显子和第7外显子双重跳跃型（FOXP3Δ2Δ7）。其中，FOXP3FL和FOXP3Δ2是两种主要亚型，均能赋予Treg细胞对初始CD4+ T细胞的免疫抑制活性。

然而，通过靶向第2外显子的小干扰RNA（siRNA）耗竭全长FOXP3，可显著削弱人类Treg细胞的抑制能力；而第2外显子缺失的小鼠则发展为系统性自身免疫性疾病。第2外显子定位于N端抑制子结构域的中部区域，是FOXP3介导的转录抑制所必需的。该外显子可介导FOXP3 N端结构域的自身抑制功能。此外，与FOXP3FL亚型不同，FOXP3Δ2亚型对核因子κB及视黄酸受体相关孤儿受体α（RORα）介导的基因表达无调控作用。由于第2外显子缺失核输出信号，FOXP3Δ2主要定位于细胞核。因此，第2外显子对FOXP3的功能及亚细胞定位至关重要，其缺失会削弱FOXP3的功能。与人类不同的是，小鼠Foxp3仅表达为全长蛋白。因此，人类为何存在第2外显子缺失的FOXP3亚型仍令人费解。此外，人类Treg细胞中第2外显子可变剪接的潜在调控机制尚不明确。

图1.Treg细胞需要Srsf3（摘自Science Advances ）

Treg细胞中FOXP3表达的分子机制备受关注。多项研究表明，FOXP3的表达在转录水平受到转录因子及DNA甲基化（例如保守非编码DNA序列元件）的严密调控。在翻译后修饰水平，蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）对第48位及第51位精氨酸的甲基化修饰对FOXP3功能至关重要；去泛素化酶USP7介导的赖氨酸残基去泛素化及p300介导的超乙酰化可增加FOXP3蛋白稳定性。此外，OX40共刺激通路介导的Foxp3启动子去乙酰化可抑制FOXP3表达。FOXP3的表达受转化生长因子β、T细胞受体（TCR）及CD28等多条信号通路调控。然而，可变剪接如何参与调控人类FOXP3表达仍需进一步阐明。

在肿瘤组织中，Treg细胞数量增加且免疫抑制功能增强，它们通过抑制抗肿瘤免疫、协助肿瘤细胞逃避免疫监视与攻击，并诱导免疫治疗耐药。针对Treg细胞的治疗策略展现了一定的抗肿瘤潜力，但其疗效仍需进一步验证。因此，深入理解肿瘤微环境中（尤其是人类癌症中）Treg细胞功能与稳定性的调控机制至关重要。

在本研究中，通过构建人源化小鼠模型（将人类FOXP3第2外显子及其两侧各50 bp的内含子序列替换小鼠Foxp3相应基因组序列），作者确定了Treg细胞中第2外显子缺失对肿瘤发生及瘤内CD8+ T细胞浸润的影响。研究发现，富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子3（SRSF3）是Treg细胞中FOXP3第2外显子保留及翻译的关键因子。通过构建Treg细胞特异性Srsf3基因敲除（KO）小鼠，作者发现SRSF3在维持Treg细胞功能中起关键作用——基因敲除小鼠发展为致死性系统性炎症。作者证实，人类肿瘤组织中的Treg细胞高表达SRSF3，且其表达水平与人类癌症进展呈正相关。本研究揭示了SRSF3通过调控FOXP3第2外显子剪接，在肿瘤免疫与自身免疫中决定Treg细胞命运及功能的崭新作用机制。

参考消息：https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.aeh1671